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模擬微重力環(huán)境下牙周膜干細(xì)胞的生長特性與機(jī)制探索
一、微重力環(huán)境:打破地面培養(yǎng)的“三維限制”地面重力環(huán)境下,牙周膜干細(xì)胞(PDLSCs)常因貼壁生長形成二維單層結(jié)構(gòu),難以模擬體內(nèi)三維微環(huán)境。而模擬微重力環(huán)境(如旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器培養(yǎng))通過消除重力矢量的單向作用,使細(xì)胞呈懸浮狀態(tài)自由生長,為構(gòu)建類天然牙周組織的三維結(jié)構(gòu)提供了可能。這種培養(yǎng)方式下,細(xì)胞間的相互作用及細(xì)胞-基質(zhì)信號傳導(dǎo)更接近體內(nèi)環(huán)境,是突破傳統(tǒng)二維培......
①引物長度一般引物長度為18~30堿基??偟恼f來,決定引物退火溫度(Tm值)重要的因素就是引物的長度。有以下公式可以用于粗略計(jì)算引物的退火溫度。在引物長度小于20bp時:[4(G+C)+2(A+T)]-5℃在引物長度大于20bp時:62.3℃+0.41℃(%G-C)-500/length-5℃另外有許多軟件也可以對退火......
傳統(tǒng)靜態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)是在培養(yǎng)瓶或皿中進(jìn)行的。無論是細(xì)胞或組織均生長在二維平面空間并接觸玻璃或塑料表面。這樣的方式會影響細(xì)胞中基因的表達(dá)且無法持續(xù)生長及分化。同時平面培養(yǎng)的細(xì)胞還會發(fā)生“去分化”(dedifferentiation)現(xiàn)象,使培養(yǎng)的細(xì)胞逐漸失去其來源組織的許多生理特征。而大部分動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)中,細(xì)胞或組織是有物理......
幾個基本原則:1.必須是現(xiàn)有機(jī)器配置可以檢測到的。2.對于多色實(shí)驗(yàn),熒光素本身的熒光強(qiáng)度和抗原表達(dá)的水平應(yīng)該是反比。簡單的說表達(dá)多的抗原所使用的熒光素要選相對較暗的,而表達(dá)低的就選較亮的。3.多色實(shí)驗(yàn)選不同激光激發(fā),釋放光譜重疊小的熒光素。光源的選擇主要根據(jù)被激發(fā)物質(zhì)的激發(fā)光譜而定。氬離子激光器的發(fā)射光譜中,綠光514......
熒光定量PCR儀可標(biāo)記有熒光素的探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復(fù)性,適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律,與模板DNA互補(bǔ)配對的探針被切斷,熒光素游離于反應(yīng)體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長,通過實(shí)時檢測與之對應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號強(qiáng)度,求得CT值,......
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